大鼠ELISA試劑盒采納雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被雌激素(E)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最后的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌激素(E)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。
 

　　大鼠ELISA試劑盒保存在28℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶全溶解后再使用。試驗中不用的板條應立刻放回自封袋中，密封(低溫干燥)保存。濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對比或者空白；依照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，最結束果乘以5才是樣本實際濃度。嚴格依照說明書中標明的時間、加液量及次序進行溫育操作。全部液體組分使用前應充分搖勻。
 

　　大鼠ELISA試劑盒一般是可以通過酶標儀使用。酶標儀即酶聯免疫檢測儀，是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動兩大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計，即用比色法來進行分析。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。